Estandarización de la técnica de isoelectroenfoque en semillas de maravilla, canola y raps

Abstract

El objetivo de este estudio fue estandarizar la técnica de isoelectroenfoque para semillas de maravilla, canola y raps, y definir la tinción (tinción de proteínas totales o tinción enzimática) para así determinar la identidad varietal y la pureza de semillas de estas especies. La evaluación se realizó en la "Unidad de Biotecnología Agropecuaria" del Servicio Agrícola y Ganadero (SAG). Esta unidad del SAG, cuenta actualmente con la técnica de isolectroenfoque para la determinación de identidad varietal de semilla de maíz, como apoyo a las observaciones de campo que se realizan dentro del proceso de certificación de semillas de esta especie y desea implementarla para maravilla, canola y raps. Para poder comparar la efectividad de la técnica y determinar el nivel de discriminación de ésta en su identificación de variedades, se utilizaron dos variedades distintas de cada especie. En el caso de la maravilla, las variedades utilizadas fueron PHA 371 y FertiOlei, mientras que para canola se utilizó la variedad D5065 y la variedad Z 5196 y para raps se utilizaron las variedades CA 1841 Y OJH252. Se realizó en primer lugar la estandari zación de la técnica subsanando varios de los problemas encontrados en los primeros geles realizados. Posteriormente se realizó la extracción de proteínas a partir de semillas de maravilla, canola y raps. Se realizó el isoelectroenfoque la tinción con plata (proteínas totales) y la tinción de la enzima Diaorasa. Se comparó ambas tinciones en cada especie variedad. Los resultados indican que el isoelectroenfoque es una técnica electroforética que cumple con la finalidad propuesta, ya que logra ser una técnica discriminatoria para identificar variedades y muestras fuera de tipo de manera rápida efectiva y segura. Con respecto a los tipos de revelado utilizados en este estudio, la tinción con plata resulta ser más concluyente que la tinción de la enzima Diaforasa, ya que a pesar de esta última es una tinción más especifica. su éxito depende de varios factores, es frecuente que genere geles transparentes con una baja resolución de las bandas, difíciles de interpretar y poco concluyentes. Las muestras de maravillas presentaron una menor cantidad de semillas fuera de tipo que las muestras de canola y de raps debido al control del inbreeding y a los mecanismo de producción de híbridos de estas especies.

El objetivo de este estudio fue estandarizar la técnica de isoelectroenfoque para semillas de maravilla, canola y raps, y definir la tinción (tinción de proteínas totales o tinción enzimática) para así determinar la identidad varietal y la pureza de semillas de estas especies. La evaluación se realizó en la "Unidad de Biotecnología Agropecuaria" del Servicio Agrícola y Ganadero (SAG). Esta unidad del SAG, cuenta actualmente con la técnica de isolectroenfoque para la determinación de identidad varietal de semilla de maíz, como apoyo a las observaciones de campo que se realizan dentro del proceso de certificación de semillas de esta especie y desea implementarla para maravilla, canola y raps. Para poder comparar la efectividad de la técnica y determinar el nivel de discriminación de ésta en su identificación de variedades, se utilizaron dos variedades distintas de cada especie. En el caso de la maravilla, las variedades utilizadas fueron PHA 371 y FertiOlei, mientras que para canola se utilizó la variedad D5065 y la variedad Z 5196 y para raps se utilizaron las variedades CA 1841 Y OJH252. Se realizó en primer lugar la estandari zación de la técnica subsanando varios de los problemas encontrados en los primeros geles realizados. Posteriormente se realizó la extracción de proteínas a partir de semillas de maravilla, canola y raps. Se realizó el isoelectroenfoque la tinción con plata (proteínas totales) y la tinción de la enzima Diaorasa. Se comparó ambas tinciones en cada especie variedad. Los resultados indican que el isoelectroenfoque es una técnica electroforética que cumple con la finalidad propuesta, ya que logra ser una técnica discriminatoria para identificar variedades y muestras fuera de tipo de manera rápida efectiva y segura. Con respecto a los tipos de revelado utilizados en este estudio, la tinción con plata resulta ser más concluyente que la tinción de la enzima Diaforasa, ya que a pesar de esta última es una tinción más especifica. su éxito depende de varios factores, es frecuente que genere geles transparentes con una baja resolución de las bandas, difíciles de interpretar y poco concluyentes. Las muestras de maravillas presentaron una menor cantidad de semillas fuera de tipo que las muestras de canola y de raps debido al control del inbreeding y a los mecanismo de producción de híbridos de estas especies.